生物荧光分析滤光片

在荧光光谱中，来自宽带光源或激光的光入射到样品上，然后样品可能会发出微弱的荧光信号。荧光滤光片组通常由激发滤光片、二向色镜（二向分光镜）和发射滤光片组成，它们组合在一个滤光片立方体中。激发滤光片用于确保只有所需波长入射到样品上，而发射滤光片用于传递荧光信号并拒绝激发光和任何不需要的光。二向色镜通常以 45° 的入射角使用，以将激发光反射到样品并将发射信号传输到检测器。激发、发射和二向色滤光片通常成组使用，以最大化所需信号并最小化任何不需要的信号。

（荧光显微镜原理）

生物荧光分析常用的就是荧光光谱法分析，常用于共聚焦光路和流式细胞术中。

（共聚光路）

流式细胞分析的光学系统

光学系统由激光器和若干组透镜、滤光片及小孔组成，它们分别将不同波长的荧光信号送入到不同的电子探测器。其主要光学元件是分色反射镜(DL)和滤光片(filter)。分色反射镜(488DL、550DL、600DL、640DL)用于选择被测荧光波长，只允许大于特定波长的光通过，而将小于特定波长的光反射到光电检测器（长波通特性）。滤光片一般分为三类：长通滤片(long pass filter，LP)、短通滤片(short pass filter，SP)和带通滤片(band pass filter，BP)。

例如，FITC染料发射出525?nm的绿色荧光，PE染料发射出575?nm的橙色荧光，分别选择550DL和525BP组成的滤片组和600DL和575BP滤片组，即可达到特异地接收FITC和PE荧光信号的目的。光电倍增管和硅光电二极管，可分别将侧向散射光和前向散射光以及525～675等不同的荧光信号收集检测。

（流式细胞仪原理图）

原理描述：单细胞液流经过细胞室，激光照射细胞(或微粒)，细胞或微粒上承载的荧光抗体被激发后发出特定波长的荧光，并分别通过不同滤光片，检测器收集不同波长的荧光信号，经计算机分析处理，将各通道的数字转换为图形显示出来。

荧光滤光片参考